Terapia génica en la enfermedad de Alzheimer

TIPO:                         Terapia génica en células somáticas colinérgicas neuronales del cerebro anterior basal

LUGAR:                    Ex-Vivo

PROCEDIMIENTO: Esta terapia se realizó:

·         En ocho pacientes, cinco mujeres y tres hombres entre 54-76 años con enfermedad de Alzheimer en etapa temprana.

·         Se implanto fibroblastos obtenidos a partir de pequeñas biopsias de piel y modificados genéticamente ex vivo para expresar NGF humano.

·         Las células modificadas se inyectaron  en el prosencéfalo con una sesión quirúrgica.

GEN A TRATAR:    NGF nerve growth factor

ESTRATÉGIA:        Vector: virus leucemia de Moloney

RESULTADOS:

·         El NGF reduce la pérdida de neuronas colinérgicas, simula la función de estas neuronas y mejora la memoria en pacientes con de Alzheimer

·         Los estudios en animales indican que sobrevivieron a estudio insertando los genes modificados genéticamente.

·         Después de 18 meses del tratamiento se realizó el test de MMSE y los pacientes mostraron una mejora en su puntuación

·         Uno de los pacientes murió por una hemorragia causada por cirugía

·         Otro de los pacientes sufrió dos episodios sincopales

                                   

Ventajas:      Mejora la memoria Previene la degeneración colinérgica   Las células implantadas no migran No causa efectos tóxicos  No forma tumores

                      

Desventajas: Puede producir dolores de cabeza, espalda Pérdida de peso

BIBLIOGRAFÍA: http://thejns.org/doi/pdf/10.3171/foc.2002.13.5.6 
                             http://www.nature.com/nm/journal/v11/n5/full/nm1239.html 

USO DE TRANSGENICOS EN LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER

En los últimos años se han generado con éxito varias líneas transgénicas basadas en la expresión en cerebro de ratón de la proteína precursora del amiloide humana mutada

 

 

En varias líneas de ratones transgénicos creadas y caracterizadas hasta el momento, la sobreexpresión en cerebro de la proteína precursora del amiloide humana (APPh) mutada da lugar a la aparición de placas de beta-amiloide en áreas límbicas y corticales de forma similar a lo que ocurre en cerebros humanos con enfermedad de Alzheimer.

 

En ratones y ratas: Murinos

http://revistaalzheimer.com/PDF/0045.pdf

 

 webjam-upload.s3.amazonaws.com/2jvmUO-izi_Modelos%20experimentales%20de%20la%20enfermedad%20de%20Alzheimer.pdf

 

 

 

ADN recombinante Artificial en la Enfermedad de Alzheimer

La Kalicreína tipo 6 (hk6) es una serín proteasa expresada principalmente en el cerebro humano. En pacientes con Enfermedad de Alzheimer la concentración de hK6 en líquido cefalorraquídeo es 3 veces superior a los controles. Son necesarios estudios más amplios para demostrar la utilidad de esta proteína como biomarcador de la EA como el procedimiento que sigue nuestro grupo para la clonación y purificación de hk6.


El primer paso para la clonación de la Kalicreína fue su purificación, luego la hk6 fue insertada en el plásmido pCDNA6.2/WG/V5/D-TOPO, dicho vector fue transfectado en células HEK293 usando fugene 6.0, después se analizó usando Western-Blod incubados con anticuerpos V5.

Artículo:
http://imedpub.comfojs/index.php/archmed/article/viewFile/137/132

Otros tipos de pruebas moleculares para el Alzheimer

En la actualidad se usa una serie de procedimientos tanto para el estudio como para el diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer:

 

 

También se están realizando otro tipo procedimientos nuevos como estos :
- Separación porMALDI-TOF (tenología MassArray® de Sequenom)
-  Braak staging
-  Hibridación en micro esferas
-  Florbetapir para alzheimer (tomografía usando droga florbetapir)
 
Así como también se está investigando procedimientos mas simples como por ejemplo el estudio de marcadores biológicos en muestras biológicas:

 

BIBLIOGRAFÍA:
- http://www.madrimasd.org/informacionidi/biblioteca/publicacion/doc/vt/vt18_ultimos_avances_diagnostico_molecular_e_imagen_alzheimer.pdf 
- http://link.springer.com/article/10.1007/s00401-006-0127-z/fulltext.html
- http://www.medigraphic.com/pdfs/revmexneu/rmn-2006/rmn064e.pdf
- http://www.revistaalzheimer.com/PDF/0204.pdf 

- http://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMp1208061

Recombinación de los Ácidos Nucleicos existentes en la naturaleza

Recombinación de los Ácidos Nucleicos existentes en la naturaleza

La recombinación genética es el proceso por el cual una hebra de material genético (usualmente ADN, pero también puede ser ARN) se corta y luego se une a una molécula de material genético diferente.

EJEMPLO:
La transducción es un proceso mediante el cual el ADN es transferido desde una bacteria a otra mediante la acción de un virus. También se utiliza para designar al proceso mediante el cual ADN exógeno es introducido en una célula mediante un vector viral.

  

BIBLIOGRAFÍA:

http://www.medigraphic.com/pdfs/lamicro/mi-2008/mi08-1_2e.pdf 

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK21760/?redirect-on-error=__HOME__

Mecanismos genéticos moleculares del Alzheimer

Niveles genéticos moleculares del Alzheimer

Resumen

GENÓMICO

APP PS1 PS2 APOE

EPIGENÓMICO

plomo (Pb)

Dieta

edad

daño oxidativo

metiltransferasas de ADN , hipo e hipermetilación

PROTEÓMICO

Proteína beta mieloide

TRANSCRIPCIONAL

Aumento de la actividad del factor de transcripción del gen APP

EXOMICO

Relacionados los miRNA característicos

TRADUCCIONAL

APOE mutado puede originar 3 isoformas de la misma proteína : E2 , E3  y E4 . Cuando E4 es alto es un indicador de Alzheimer

BIBLIOGRAFÍA:

 -  http://www.revistaalzheimer.com/PDF/0177.pdf 

 PCR EN ENFERMEDAD DE ALZHEIMER

La PCR es una técnica que sirve para amplificar un fragmento de ADN y su relación    con el Alzheimer esta muy marcada. En el siguiente artículo se realiza un estudio del    Gen ApoE tanto para determinar la asociación de sus alelos con la EA como para    determinarlo como un indicador diagnóstico.

Se amplificó la región variablede 267 pb de la ApoE a partir del ADN genómico    mediante oligonucleotidos específicos.

  
 

ARTÍCULO : http://digital.csic.es/bitstream/10261/24890/1/F.Valdivieso_J.Neurosc.Meth._238.pdf

Adjunnto el detalle del proceso de PCR en la Enfermedad de Alzheimer: http://www.sabiosciences.com/copynumber_product/HTML/VAHS-0502Z.html
 

Relación entre Epigenética y la enfermedad de Alzheimer 

La Patología de la EA se caracteriza por placas seniles y ovillos neurofibrilares (NFT). Los principales componentes de las placas seniles son 39-42 péptidos de aminoácidos, cortó a partir de una proteína más grande llamada proteína precursora de beta-amiloide (APP).
 

Algunos estudios apuntan a un posible papel de los cambios epigenéticos en la etiología de la EA. Pacientes con EA son de los pocos que pueden mostrar altos de homocisteína (HCY) y B12 baja y folato       en la sangre, lo que sugiere una desregulación en el ciclo des-adenosilmetionina necesaria para la regulación epigenética por metilación del ADN.  

En pacientes que sufren Alzeheimer, losgenes que codifican para las proteínas pre-nisilina 1(precursora de la beta amiloidea), prenisilina 2 y APOE cuentan con un patrón de metilación anormales, lo que deriva en la producción de proteínas anómalas.

BIBLIOGRAFÍA:

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2673453/pdf/nihms99941.pdf

http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0006617